線粒體膜電位熒光探針是我們的膜標(biāo)記1-43的縮寫，化學(xué)上稱為N-（3-三乙基氨基丙基）-4-（4-（二丁基氨基）苯乙烯基）吡啶鎓二溴化物。它是一種水溶性膜探針，屬于苯乙烯基染料家族。它廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)，因為它對細(xì)胞的毒性極小。線粒體膜電位熒光探針在水性介質(zhì)中幾乎不發(fā)熒光，并且在與膜結(jié)合后強(qiáng)烈發(fā)熒光。它用標(biāo)準(zhǔn)熒光素光學(xué)濾光片有效激發(fā)，并且當(dāng)與質(zhì)膜結(jié)合時表現(xiàn)出強(qiáng)烈的熒光信號。線粒體膜電位熒光探針經(jīng)常被用于量化神經(jīng)元中的胞吐作用。
線粒體膜電位熒光探針是一種新型的用來監(jiān)測線粒體膜電位變化的熒光探針，是JC-1的*替代物。與JC-1相比，具有以下幾個重要優(yōu)勢：
1、溶解性得以改良，在水溶液中形成沉淀可能性明顯降低；
2、使用更方便，簡化步驟將手動操作時間最小化；
3、熒光信號更高，改良的信號與背景熒光的信噪比；
4、結(jié)果更穩(wěn)定，優(yōu)化探針以保證更連續(xù)性和穩(wěn)定性結(jié)果。
使用方法：
1、染色液制備：
①儲存液制備：用DMSO或無水乙醇配置濃度1～5 mM的儲存液。例如，取10mg 熒光探針（Mw：460.31 g/mol）溶于4.35ml 無水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的儲存液。
②工作液制備：用合適的緩沖液稀釋儲存液，調(diào)整到合適的工作濃度。
2、染色方法：
對于細(xì)菌染色，最好取對數(shù)生長期的健康細(xì)菌，用無菌PBS或其他適當(dāng)平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 106cells/ml。也可直接從細(xì)菌培養(yǎng)液中取適量的細(xì)菌不經(jīng)清洗進(jìn)行稀釋。細(xì)菌染色用熒光探針的工作濃度可為30μM，室溫染色15~30min。
