貨號規(guī)格 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
FS0353-100MG | Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺 | 100mg | 340.00 |
FS0353-500MG | Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺 | 500mg | 1450.00 |
FS0353-1000MG | Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas | 1g | 2300.00 |
產(chǎn)品描述
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,常用縮寫RNase A),一種含4個二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7kDa(氨基酸序列)。作為一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。具體來說,切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團(tuán)形成的磷酸二酯鍵,從而使得2’, 3’-環(huán)磷酸水解為對應(yīng)的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)RNase A切割產(chǎn)生pG-pG-pCp 和A-PG)。RNase A切割單鏈RNA活性high,推薦工作濃度為1-100μg/ml,兼容于各種反應(yīng)體系。低鹽濃度(0-100mM NaCl),可用來切割單鏈RNA,雙鏈RNA,以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而,高鹽濃度(≥0.3M),RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A(RNase A)常見的應(yīng)用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA,此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來滅活DNase活性。另外,本品還可用于RNA酶保護(hù)分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品屬性
外觀:白色凍干粉末
激活劑:鈉鹽、鉀鹽等
抑制劑:核酸酶抑制劑
失活方法:加熱不會失活,建議用離心柱或者酚氯fang抽提來充分去除
來源:牛胰腺
溶解性:溶于水(10mg/ml)
干燥失重:≤5.0%
酶活力:≥50 Kunitz units/mg 活性同sigma R4875
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃干燥保存,3年有效。
注意事項(xiàng)
1) 本品在生產(chǎn)過程中已經(jīng)過相應(yīng)方法去除DNase污染,對于常規(guī)質(zhì)粒DNA或者基因組DNA抽提(不需要嚴(yán)格定量DNA水平)的應(yīng)用,可不需要高溫煮沸,直接配制母液即可。對于需要嚴(yán)格控制DNase酶殘留的實(shí)驗(yàn),建議高溫煮沸或者購買DNase-free, protease-free的RNase A溶液(10mg/ml)
2) RNase A會強(qiáng)吸附在玻璃器皿上,建議溶液裝到塑料離心管內(nèi)。
3) 對于同時操作完整RNA實(shí)驗(yàn)的研究人員,一定要謹(jǐn)防RNase A引入干擾試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
儲存液制備
注意:此為RNase A儲存液配制的常用方法之一,也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng)的方法,或者參考文獻(xiàn)資料使用其他方法制備儲存液(如直接溶于10mM Tris-Cl, pH7.5;或者Tris-NaCl溶液)。
1) 利用10mM的醋酸鈉(pH5.2)制備10mg/ml 的RNase A 儲存液;
2) 00℃加熱15min;
3) 冷卻到室溫,加入1/10體積的1M Tris-HCl(pH7.4),調(diào)其pH至7.4(例如,5ml 10mg/ml的RNase 儲存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4);
4) 分裝于-20℃凍存,可穩(wěn)定保存長達(dá)2年。
注意:在中性條件下煮沸RNase A溶液,會有RNase沉淀形成;在更低的pH下將其煮沸,如有沉淀可以觀察到,可能由于蛋白雜質(zhì)存在造成。煮沸之后若發(fā)現(xiàn)沉淀,可通過高速離心(13,000 rpm)去除雜質(zhì),然后分裝凍存
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。